常规光镜检查的石蜡切片厚度通常为2 μm，切取连续切片8~12张，每张玻片上捞取2~4张切面。常规染色应包括4种，分别是苏木素-伊红染色（HE）、PAS染色（PAS）、马松三色染色（Masson-trichrome）和六胺银染色（periodic-acid silver methenamine，PASM）。每种染色显示的主要病变各有不同。HE染色可以观察细胞的形态和种类、色素颗粒、坏死病变以及各种结晶和管型等；必要时辅以偏振光，有助于判断结晶的性质，如草酸盐结晶有折光性，磷酸盐结晶无折光性。PAS染色主要显示糖蛋白，因此可以观察细胞的基底膜、细胞外基质和一些细胞内蛋白，因此是肾活检组织光镜病理检查的必备染色，对于观察基底膜病变、细胞外基质的增多、各种细胞的增生及渗出、鉴别沉积的物质是否富含糖链等病变具有优势。马松三色染色既可以显示基底膜、细胞外基质和间质的胶原纤维，也可以显示嗜复红蛋白沉积、纤维素渗出和血栓形成，因此，主要用以观察免疫复合物的沉积部位、纤维素样坏死和肾间质纤维化等病变程度。六胺银染色可以更清晰地显示基底膜病变与细胞外基质增多，便于对基底膜的钉突、链环和双轨征的观察，同时，也可以观察鲍曼囊壁、动脉的血管弹力膜和嗜银蛋白的沉积等。此外，PASM-Masson套染在银染的基础上，同时可以观察嗜复红蛋白的沉积部位、纤维素样坏死和血栓等病变，推荐使用该染色^[8]。

此外，对于一些少见的病变和特殊的病理类型还需要进行其他特殊染色。如淀粉样变性，应切厚片，6~8 μm，行刚果红染色，并需要在偏振光显微镜下观察是否有苹果绿-橙黄色的双折光；怀疑脂质沉积时，应用冰冻切片进行油红O染色；怀疑含铁血黄素时，需行普鲁士蓝染色。von Kossa染色主要显示磷酸钙的沉积。PAS或银染还可以初步观察真菌，抗酸染色可以观察结核杆菌等。

免疫病理检查包括冰冻切片的IF染色或石蜡切片的免疫组化染色。推荐使用冰冻切片，采用直接IF法检查。若标本储存和运送的时间较长，则需要置于荧光标本保存液（Michel或Zeus液）中运输；因荧光信号易于衰减或淬灭，无法长期保存，应及时拍照存储。冰冻切片厚度一般为3 μm，常规IF检查项目应包括免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）、补体（C3、C1q）和轻链（κ、λ）染色。对于特殊病例，还需加做其他染色，如淀粉样变前体蛋白（AA等）、纤连蛋白、Ⅲ型胶原、Ⅳ型胶原α链、乙型肝炎病毒抗原、丙型肝炎病毒抗原等；对于膜性肾病，需要加做IgG亚型和磷脂酶A2受体（PLA2R）。对于移植肾标本，还应加做C4d和BK病毒染色。高质量的免疫荧光染色，需要建立稳定的、易于操作的实验流程和质控标准，包括设立严格的阴性和阳性对照，以保证免疫荧光染色的高敏感性和特异性。

免疫组化染色主要作为免疫荧光染色的补充方法，用于细胞内表达抗原的检测和细胞表型的鉴定等，如病毒抗原包括BK、巨细胞病毒（CMV）等病毒抗原染色及近端肾小管上皮内结晶成分鉴定等；对于淋巴增殖性细胞的表型鉴定，如淋巴细胞（B或T细胞）、浆细胞、巨噬细胞等。此外，石蜡切片的IF检查对于诊断单克隆丙种球蛋白病相关肾损害较有价值，对于常规的直接法冰冻切片IF出现单克隆免疫球蛋白（MIg）假阴性时，运用石蜡包埋组织切片的酶消化后IF检查，可提高MIg检查的敏感性。如果IF未取到肾小球或IF样本保存不当时，可利用石蜡切片进行抗原修复后再进行IF或免疫组化染色，作为IF检查的一种替补手段^[9]。

电镜检查在肾脏疾病的病理诊断中具有不可替代的作用。所有的自体肾活检组织应常规进行透射电镜检查，移植肾标本建议应留取电镜标本，必要时进行电镜检查以辅助诊断。电镜样本的及时固定是保证超微结构清晰的关键步骤，组织离体后应在1 min内放入2.5%~3.0%戊二醛固定液中，随后进行1%四氧化锇后固定及后续标本制备过程，通常由专业的电镜实验室完成。依次进行系列丙酮脱水、浸透及树脂包埋剂（多采用Epon812）包埋，制成树脂包埋块；然后，进行1 μm厚半薄切片，经过甲苯胺蓝染色后选取肾小球及感兴趣的病变部位行超薄切片，应避免选取硬化的和结构破坏的肾小球，最后经过醋酸铀和枸橼酸铅染色，在透射电镜下进行观察和数码照相。对于无电镜标本或电镜标本无肾小球时，也可以用石蜡标本改作电镜标本，尽管组织细胞的超微结构稍差。但对于基底膜的结构、电子致密物的沉积仍能较准确地判断，可以为病理诊断提供必要的信息。少数特殊情况下，通过胶体金标记的免疫电镜技术，也可以协助疾病的诊断和分型，如副蛋白相关肾损害的早期病变诊断^[10]。

首先要进行切片组织样本的核对，包括与病理申请单上的患者信息和病理编号进行核对，与肾活检取材时记录的大体样本核对，包括光镜样本、免疫荧光样本和电镜样本的组织大小与块数等，确保患者与观察样本的对应无误。通常需要建一个包含病理申请单上的患者信息、样本来源信息、取材时间及其编号（包括光镜、免疫荧光和电镜的编号）在内的病理标本登记本（或电子表格）。每种病理检查阅片前，需要核对上述信息。

光镜组织病理学观察能够反映肾脏整体病理改变的特点，包括肾小球、肾小管、肾间质以及肾血管等各个部位的组织结构改变、外来的免疫沉积物及其分布范围和严重程度，是反映肾脏病理改变的基石。从低倍整体观察，到高倍具体病变的辨别，并在不同染色切片进行分析比对。首先对活检组织的取材状况及突出病变进行整体评估，包括活检组织块的大小和数目、皮质和髓质的比例，硬化的肾小球及可观察肾小球的数目、肾小球的体积及血液灌注状态等。肾小球病变的观察包括系膜病变（系膜细胞增生、系膜基质增多、系膜区增宽、系膜结节状硬化、分叶状改变、系膜溶解及系膜沉积物等）、毛细血管腔内病变（毛细血管腔内细胞增多、中性粒细胞浸润、血栓、白金耳结构、透明血栓、脂蛋白栓塞等）、肾小球毛细血管壁病变（肾小球毛细血管壁皱缩、血栓性微血管病样病变、基底膜增厚、钉突样或链环样改变、双轨征及睫毛状或毛刺样改变）、肾小球毛细血管袢病变（纤维素样坏死、节段性硬化、球囊粘连等）、毛细血管外病变即新月体形成（细胞性、细胞纤维性及纤维性新月体）和鲍曼囊壁病变（球囊滴状变性、囊壁增厚、囊壁断裂、囊周纤维化等）。

肾小管间质病变的观察，包括急性病变和慢性病变的观察。急性肾小管损伤观察肾小管上皮细胞坏死、空泡变性、蛋白质吸收滴、刷状缘脱落、崩解及再生、裸基底膜等；急性间质性肾炎观察肾间质水肿及炎症病变的面积、部位（在皮质、髓质的分布）以及浸润的细胞成分（淋巴、单核巨噬细胞，嗜酸性或中性粒细胞、浆细胞等）等；对肾小管腔内管型（红细胞管型、白细胞管型、Tamm-Horsfall蛋白管型、骨髓瘤管型）、肾小管间质内结晶（尿酸盐、草酸盐、磷酸盐等）及肉芽肿结构等逐一观察。移植肾标本还需要对肾间质炎症、肾间质出血、肾小管炎、管周毛细血管炎以及肾小管上皮内病毒包涵体等观察及半定量评估。肾间质纤维化伴肾小管萎缩（IFTA）病变，应根据其占肾皮质面积的比例，分为轻度（≤25%）、中度（26%~50%）及重度（>50%）进行描述。

肾血管病变的观察，常见病变包括细小动脉的玻璃样变性和小叶间动脉内膜增厚及管腔狭窄，其他血管病变包括血管壁纤维素样坏死、血管炎、动脉内膜炎以及血栓性微血管病（包括小动脉内膜黏液样水肿、洋葱皮样增生及血栓形成）等。通常对动脉内膜纤维性硬化病变进行半定量评分，根据动脉管腔狭窄的比例，分为轻度（≤25%管腔狭窄）、中度（26%~50%管腔狭窄）及重度（>50%管腔狭窄）。

免疫荧光检查能够检测肾组织内沉积的各种免疫球蛋白及轻链的种类、补体成分、纤维蛋白原或其他特殊蛋白（淀粉样蛋白）等，也可检测构成免疫复合物的抗原成分，如乙型肝炎病毒抗原、PLA2R等，因而能够初步反映肾小球疾病的发病机制以及提供相关病因学证据。免疫荧光检查的结果判定应对全部标本进行详细观察，包括皮质及髓质区，记录肾小球的总数目、硬化及节段性硬化的肾小球数目、伴毛细血管袢坏死及含新月体的肾小球数目等，观察荧光阳性的成分、强度、分布方式及沉积部位等。通常根据荧光强度分为4级（-，±，+，2+，3+）；荧光的分布方式描述为线样、细颗粒状、粗颗粒状、团块状、花瓣样、条带样或片块状等；荧光阳性的部位，包括系膜区、肾小球毛细血管壁、鲍曼囊壁、肾小管上皮及肾小管基底膜、肾间质和血管壁等，对于肾小球的分布范围可描述为弥漫性、局灶性、球性或节段性，需要具体描述荧光阳性的肾小球比例及其阳性部位，对于管型的阳性成分，重点比较两种轻链的荧光强度。值得注意的是，IgM、补体C3和C1q在肾小球节段性硬化病灶或瘢痕组织上均可呈节段阳性。且大多数肾间质、血管壁可见局灶性C3阳性，而肾小管管型则呈现IgA、κ和λ同时阳性。这些可作为荧光染色质量的内部阳性对照。

电镜检查具有高分辨性能特点，能够观察光镜难以分辨的早期和细微结构异常，同时也可对表现为电子致密物的免疫复合物进行精确定位，因而能够弥补光镜和免疫荧光检查的不足。电镜检查主要在肾小球疾病的诊断中具有重要价值。电镜观察时首先低倍下分辨肾小球及肾小管，对肾小球的结构进行详细观察，包括足细胞结构及足突融合程度、基底膜厚度与其结构、内皮细胞内管网状结构、内皮下内疏松层增宽、电子致密物的沉积部位（上皮下、基底膜内、内皮下及系膜区）、特殊亚结构（纤维丝、微管、结晶、胶原纤维、髓磷脂样小体、脂蛋白空泡等），并在高倍对基底膜厚度、纤维丝及微管的直径等进行测量。还要观察肾小管上皮细胞内特殊包涵体如结晶、病毒颗粒等、肾小管基底膜的电子致密物沉积、肾间质的浸润细胞类型、管周毛细血管基底膜的分层化（针对移植肾标本）等。

肾活检病理诊断需要将光镜、免疫荧光和电镜检查的病理特点进行整合分析，最后还需要结合临床和实验室检查，得出最终的病理诊断。通常根据光镜观察结果，对肾活检组织的基本病理改变有整体的把握，判断出病变的主要部位，是以肾小球病变为主，还是以肾小管-间质病变或血管病变为主，或是两个以上部位病变同时存在；其次，判断病变的分布范围、急慢性特点、病变的严重程度等，如局灶性或弥漫性、节段性或球性、增生性或非增生性、坏死性或硬化性等。进一步根据免疫荧光特点，判断肾脏疾病是否为免疫复合物介导，是否提示补体介导，有无单克隆免疫球蛋白相关肾病的证据等。通常根据光镜和免疫荧光检查，可以对50%~70%的肾脏疾病做出初步病理诊断^[11,12]。电镜检查对于早期病变、足细胞病、基底膜病变、伴有特殊亚结构的肾脏病等具有不可替代的诊断价值，同时，对基于光镜和免疫荧光的初步病理诊断进一步证实，对疾病的分型和分期以及合并疾病的诊断也具有重要作用。最后，肾脏疾病的病理类型明确后，还需要结合临床表现，尽可能做出病因学的诊断或提示，某些病例可能需要进一步增加其他辅助检查，包括血清学检查或肾组织的特殊染色、病原学检查等，以寻找相关的病因，尽可能为临床医师提供与治疗和预后相关的信息。

肾小球疾病的病理诊断最为复杂，分为原发性、继发性和遗传性肾小球疾病；根据有无增生性病变和炎性细胞渗出，分为肾小球肾炎和肾小球病，前者包括系膜增生性、局灶增生或/和坏死性、毛细血管内增生性、系膜毛细血管增生性或膜增生性、新月体性肾小球肾炎等类型，目前推荐梅奥诊断和国际肾脏病理学会提出的肾小球肾炎新分类^[1]；而肾小球病包括微小病变肾病、局灶节段性肾小球硬化、膜性肾病等类型。光镜所见的病理改变，可以由多种不同的病因和发病机制导致，其治疗及预后也不同。如病理类型为膜性肾病的病变，若伴有系膜增生或局灶性新月体病变等，免疫荧光除IgG和C3以外，可见其他免疫球蛋白和C1q阳性时，注意除外继发性膜性肾病，如继发于乙型肝炎病毒感染相关或狼疮肾炎；根据IgG亚型和PLA2R检查，IgG4、IgG1和PLA2R阳性，诊断为PLA2R介导的原发性膜性肾病；老年的膜性肾病，若IgG1、IgG2阳性，IgG4和PLA2R阴性，注意除外肿瘤相关性膜性肾病^[13,14]。再如，膜增生性肾小球病变（MPGN）可由多种不同的病因及发病机制导致。根据免疫荧光特点，分为免疫复合物介导、补体介导（C3肾小球病）和寡免疫性；根据电镜超微结构特征，分为免疫复合物型、C3肾小球肾炎、致密物沉积病（DDD）、血栓性微血管病和伴特殊亚结构的肾小球病（Ⅲ型胶原肾小球病、纤连蛋白肾小球病）。其中，免疫复合物型MPGN的病因，结合临床特点，又分为3大类，分别是慢性感染（HCV多见，冷球蛋白血症）、自身免疫病（狼疮肾炎、干燥综合征）和副蛋白相关性肾病（Ⅰ型冷球蛋白血症和单克隆免疫球蛋白沉积病，轻链沉积病为主）^[15,16,17]。此外，还需要对肾小球病做出分型和评分，如IgA肾病的牛津分型、狼疮肾炎ISN/RPS分型、糖尿病肾病的肾小球病变分型等^{[18,19,20,21,22,23,24]}。

肾小管间质疾病分为原发性肾小管间质肾病和继发于肾小球和肾血管疾病的损伤。若肾小球病变、肾血管病变与肾小管间质损伤的病变分布和严重程度相符合，考虑为继发性肾小管间质损伤。如新月体性肾小球肾炎常伴有急性肾小管损伤及间质性肾炎；肾动脉硬化导致的缺血性肾小球硬化分布与肾小管萎缩伴间质纤维化的分布区域处于相同的血管供应部位。原发性肾小管间质肾病又可以分为肾小管损伤为主和肾间质炎症为主的两大类疾病，前者以急性肾小管损伤、肾小管坏死、肾小管萎缩等病变为主，常伴有肾间质水肿、少量的局灶性淋巴和单核细胞浸润和肾间质纤维化；后者以急性间质性肾炎、肾间质纤维化为主要病变，常伴有肾小管损伤、肾小管炎和肾小管萎缩等病变；因此，两类疾病要截然区分比较困难，有时也可为两者并存。此外，肾小管腔内管型的性质反映了不同的疾病实质。如观察到大量红细胞管型，提示活动性肾小球肾炎，特别是局灶坏死性、局灶新月体性肾小球病变的提示；如为PAS染色阴性或淡染的浓稠蛋白管型伴单核细胞浸润，提示为骨髓瘤的轻链蛋白管型。肾间质浸润细胞的性质反映了不同的病因和发病机制。肾间质最常见的浸润细胞是淋巴细胞伴少量嗜酸性粒细胞浸润，提示为药物性间质性肾炎；浆细胞浸润为主的间质性肾炎，若以分泌IgG4的浆细胞为主（占40%以上），常伴肾间质席纹状纤维化，诊断为IgG4相关性肾小管间质肾炎^[25]；若肾间质弥漫性浸润形态均一的淋巴样细胞，部分肾小管结构被破坏，提示为淋巴瘤或白血病肾实质浸润，进一步排查全身淋巴增殖性疾病，并行免疫组化检查明确诊断。

肾血管疾病多继发于全身系统性疾病，包括高血压、炎症、特殊物质沉积（淀粉样变蛋白）、毒物/药物、凝血机制异常性疾病等均可导致肾血管损伤；反之，肾血管病变也可继发或加重肾小球和肾小管间质的损伤。肾活检最常见的血管病变为小叶间动脉玻璃样变性和动脉内膜纤维性硬化，见于高血压和良性动脉硬化。动脉内膜炎见于移植肾排斥反应；透壁性血管炎伴有纤维素样坏死、炎性细胞浸润及纤维组织增生等，见于ANCA相关性血管炎、结节性多动脉炎、冷球蛋白血症、狼疮肾炎等。血栓性微血管病的血管病变具有特征性的内膜黏液样水肿、纤维素样坏死、血栓形成、洋葱皮样增生等，可伴有肾小球毛细血管的内皮增生和基底膜内疏松层增宽，严重者出现肾皮质坏死，可由多种病因导致，如溶血尿毒综合征、血栓性血小板减少性紫癜、硬皮病、恶性高血压、神经钙调蛋白抑制剂毒性等^[26]。

自体肾穿刺、移植肾穿刺、楔形肾切除、肾肿瘤切除组织等。

所获得的肾组织标本的条数、长度，分别用于光镜、免疫荧光和电镜检查的组织块数目、组织大小和所用固定液。发现组织干涸、组织结冰等情况应予以注明。

包括光镜、免疫荧光/免疫组化和电镜的结果描述，具体内容同病理阅片观察的内容。

（1）主要诊断包括：①疾病名称，即反映病因学或发病机制的疾病，如抗GBM病、狼疮肾炎、ANCA相关性血管炎等；如病因不明确，可直接进入病理类型的诊断；②病理类型：肾脏损伤的形态模式，如膜性肾病、膜增生性肾小球肾炎、新月体性肾小球肾炎等；③疾病的分型、分级或评分系统：国际上已经达成共识的病变评估和病理分型系统，包括梅奥诊所和国际肾脏病理学会提出的肾小球肾炎的病理分类共识、IgA肾病的牛津分型、狼疮肾炎ISN/RPS分型及修订意见等；④慢性化指数：节段性及球性硬化的肾小球比例、肾间质纤维化伴肾小管萎缩（IFTA）的比例、小动脉硬化的程度等；⑤其他附加信息：与主要疾病诊断相关的其他检查结果，如HCV相关肾炎、辅助信息为冷球蛋白血症类型等。（2）次要诊断：同时并存的其他肾脏病，如糖尿病或高血压等继发肾损害。

可以对病理诊断依据和疾病的进展状况等进行分析评述，也可提供部分参考文献；对于发病机制不清或病理诊断不明确的病例，结合病理所见进行讨论，提供可能的诊断方向和诊断思路，为临床医师进一步的诊断和治疗提供信息。

本共识重点讨论了规范化肾活检病理诊断的基本要求，紧密结合实际工作中的问题，从病理技术环节如肾活检标本的取材、制片及染色等方面的标准化流程，到病理阅片、基于病因学及发病机制的诊断思路以及肾活检病理报告内容和模式等方面，均提出了与国际接轨并适合国内使用的规范化建议。特别是提出在病理诊断报告中，将基于病因学和发病机制的诊断放在第一位，而病理类型居于其次，及时将肾脏疾病的发病机制进展纳入诊断分类，其目的是更注重形态学背后的病生理机制，以便为临床的诊治提供详尽的信息。希望本共识能得到国内同行的响应和建议，共同为提高肾脏病理学发展、肾脏病的诊治水平发挥积极作用。